病原生物学实验

章节摘录

版权页：   插图：   一、中国蓝琼脂平板 中国蓝和蔷薇色酸在本培养基中均作为指示剂，在酸性环境下，中国蓝为蓝色，蔷薇色酸为黄色，在碱性环境下，中国蓝由微蓝至五色，蔷薇色酸为红色。此培养基制好后的pH值为7.4，应呈淡紫红色。过碱呈鲜红色，过酸则呈蓝色，均不能用。蔷薇色酸能抑制革兰氏阳性细菌的生长，对大肠埃希菌没有抑制作用，故粪便标本接种量不宜太多。多数肠道致病菌不分解乳糖，其菌落为透明或半透明，淡红色或五色；大肠埃希菌分解乳糖产酸，形成大而浑浊的蓝色菌落。 实验材料 （1）1％蛋白胨琼脂培养基100mL、1％中国蓝水溶液（无菌）1mL、1％蔷薇色酸乙醇溶液1mL、乳糖1g。 （2）三角烧瓶、无菌培养皿等。 实验方法 （1）称取乳糖加入50℃1％蛋白胨琼脂培养基内，混匀、溶解，分装在三角烧瓶中，用棉塞塞好。 （2）置于高压蒸汽灭菌器内以55.16kPa灭菌20min。 （3）取出后待冷却至45～50℃时，无菌操作加入中国蓝水溶液和蔷薇色酸乙醇溶液混匀。 （4）以无菌擬作倾注无菌培养皿内凝固后备用。 二、伊红亚甲蓝（EMB）琼脂平板 伊红和亚甲蓝在培养基中起指示剂作用，如大肠埃希菌分解乳糖产酸使pH值降低，致使伊红和亚甲蓝相结合呈紫黑色或紫红色化合物，故菌落呈紫黑色或紫红色，且有金属光泽。在碱性环境中，伊红和亚甲蓝不能结合，故不分解乳糖的细菌菌落为无色。同时伊红和亚甲蓝还有抑菌剂的作用，能抑制除粪链球菌以外的革兰氏阳性菌的生长。 实验材料 （1）成分蛋白胨10g、乳糖5g、蔗糖5g、磷酸氢二钾2g、2％伊红水溶液20mL、0.65％亚甲蓝水溶液10mL、琼脂18～20g、蒸馏水1000mL、氢氧化钠水溶液。 （2）容量瓶、无菌培养皿等。 实验方法 （1）配制2％伊红水溶液，0.65％亚甲蓝水溶液，55.16kPa灭菌20min备用。 （2）称取蛋白胨、乳糖、蔗糖、磷酸氢二钾、琼脂粉溶于800mL蒸馏水中，用氢氧化钠溶液调整pH值至7.0～7.2，定容至1000mL。 （3）经55.16kPa灭菌20min，取出后待琼脂培养基冷却至50℃时，无菌操作加入2％伊红水溶液，0.65％亚甲蓝水溶液，混匀倾注无菌培养皿内凝固后，置于4℃保存备用。 三、SS琼脂平板 SS琼脂平板是分离沙门菌属及志贺菌属的强选择培养基，对大肠埃希菌有较强的抑制作用，而对肠道其他病原菌则无明显抑制作用。因此，可以增加粪便等标本的接种量，从而提高病原菌的检出率。故SS琼脂平板为目前公认比较满意的肠杆菌科细菌选择性培养基。SS琼脂为强选择性培养基之一，成分较多，按作用大致可以分为以下几种。 （1）营养物质：牛肉膏、蛋白胨。 （2）选择性抑菌剂：胆盐、硫代硫酸钠、柠檬酸钠、柠檬酸铁、煌绿等。 （3）促进目的菌生长剂：胆盐促进病原菌生长，特别是沙门菌属的生长。 （4）鉴别用糖：乳糖。 （5）指示剂：中性红。

书籍目录

第一篇医学微生物学实验技术 第一章细菌形态学检查法／3 实验一不染色标本的检查／3 实验二革兰氏染色法／4 实验三抗酸染色法／6 实验四荚膜染色法／7 实验五鞭毛染色法／8 实验六芽胞染色法／9 第二章细菌的培养／10 实验一培养基的制备／10 实验二细菌的培养方法及生长状态的观察／18 实验三细菌的生化反应检查法／23 实验四内毒素的检测／26 实验五细菌致病性的实验／27 第三章理化及生物因素对细菌的影响／30 实验一常用消毒灭菌法／30 实验二噬菌体特异性溶菌试验／34 实验三细菌的药物敏感性试验／35 实验四细菌的变异性试验／40 第四章化脓性球菌的病原学检测／44 实验一化脓性球菌的接种及其生长状态观察／45 实验二化脓性球菌的生化反应／46 实验三化脓性球菌的血清学试验／49 实验四化脓性球菌的动物实验／51 第五章肠道感染细菌的病原学检测／53 实验一常用培养基的制备／54 实验二肠道杆菌的生长状态观察／59 实验三肠道杆菌的血清学试验／60 实验四生化试验和微量编码测定法／62 实验五肥达试验／65 实验六霍乱弧菌的检查／68 第六章幽门螺杆菌实验检测／71 实验一幽门螺杆菌的形态及染色观察／71 实验二幽门螺杆菌的生化鉴定／72 第七章厌氧性细菌检查／73 实验一厌氧培养法／73 实验二厌氧性芽胞杆菌形态及生长状态的观察／75 第八章呼吸道感染细菌检测／77 实验一结核分枝杆菌检测／77 实验二白喉棒状杆菌的检查／79 第九章其他微生物的检查／83 实验一支原体、衣原体、立克次体的检查／83 实验二螺旋体的检查／93 第十章病毒学实验／100 实验一病毒的形态学检查法／100 实验二病毒培养法／105 实验三病毒数量与感染性的测定／112 实验四流感病毒的分离与鉴定／114 实验五乙型肝炎病毒的血清学检测法／119 实验六小儿腹泻病原体——A组轮状病毒感染的检测／124 实验七TORCH感染的检测／127 第十一章真菌和放线菌的检查／133 实验病原性真菌和放线菌的检查／133 第二篇人体寄生虫学实验 第十二章线虫／149 实验一似蚓蛔线虫／149 实验二十二指肠钩口线虫和美洲板口线虫／152 实验三蠕形住肠线虫／155 实验四毛首鞭形线虫／157 实验五马来布鲁线虫和班氏吴策线虫／158 实验六旋毛形线虫／160 第十三章吸虫实验／161 实验一华支睾吸虫／161 实验二卫氏并殖吸虫（肺吸虫）／163 实验三布氏姜片吸虫（姜片虫）／165 实验四日本裂体吸虫（日本血吸虫）／167 第十四章绦虫实验／174 实验一带绦虫／174 实验二棘球绦虫／177 实验三微小膜壳绦虫（短膜壳绦虫）／179 实验四曼氏迭宫绦虫／180 第十五章医学原虫／183 实验一溶组织内阿米巴／183 实验二结肠内阿米巴／184 实验三阴道毛滴虫／185 实验四蓝氏贾第鞭毛虫／186 实验五杜氏利什曼原虫／187 实验六疟原虫／188 实验七其他医学原虫／189 第十六章昆虫实验／193 实验一蚊／193 实验二白蛉／196 实验三蝇／198 实验四蚤／201 实验五虱及臭虫／202 实验六蜱／204 实验七螨／205 第三篇分子微生物学实验技术 第十七章基因诊断及应用技术／209 实验一基因组DNA的提取／209 实验二细菌质粒DNA的提取／211 实验三耐药质粒DNA转化实验／213 实验四PCR方法检测病原微生物／214 实验五核酸杂交法检测病原微生物／216 参考文献／220 彩图／221

编辑推荐

《全国高等医药院校国家级实验教学示范中心"十二五"规划教材:病原生物学实验(供临床医学、基础医学、护理学、医学检验等专业使用)》力求简明实用，使其适合各专业层次的教学实践的需要，同时也能为医学本科生、研究生提供一些基本的科研实验方法。

 病原生物学实验下载