一氧化氮荧光分析

章节摘录

版权页：   插图：   （1）化学类。有机染料、纳米材料（含半导体量子点、上转换稀土纳米粒子、贵金属粒子、纳米钻石等）以及金属配合物（含稀土配合物）等。 （2）生物类。藻胆蛋白、基因编码荧光蛋白（如绿色荧光探针GFP）、分子灯标（molecular beacon，一类发卡结构的寡聚核苷酸荧光探针）等。 目前应用最为广泛的为有机染料，而研究最为活跃为半导体量子点及上转换稀土纳米粒子等荧光探针。 一般地，适用于生物成像的荧光探针须具备以下性质： （1）光物理性质。便于激发和检测，不会与生物基质同时被激发，生物背景干扰小；较高的摩尔消光系数和荧光量子产率。 （2）化学性质。在相关缓冲液、细胞培养液或体液中有较好的溶解性；使用条件下的热、光稳定性；标记的位点特异性。 （3）生物相容性。标记所带来的立体或尺寸相关的干扰效应要尽量小，易于进入细胞，标记的生物毒性小。 有机染料是目前应用最为广泛的一类荧光探针。有机染料的光物理性质取决于其分子的电子跃迁类型： （1）离域于整个发色团的共振跃迁，相应的染料称为共振染料； （2）分子内电荷转移跃迁，相应的染料称为电荷转移染料。 依据结构一性质关系，可以通过精心的设计策略实现对发光性质的精细调控。大多数常见的荧光探针，诸如荧光素类、罗丹明类、大多数的氟硼荧类（BODIPY）和花菁类，都属于共振染料。其特征是：相对较窄的、通常互为镜像的吸收和发射带；溶剂极性不敏感的、较小的斯托克斯位移、高的摩尔消光系数；中等或高的荧光量子产率。然而，吸收和发射光谱的有限的分离，使得不同染料之间的相互干扰不易避免。相反地，电荷转移染料，例如香豆素类，在极性溶剂中则具有分离较好的、较宽的吸收和发射带，较大的依赖于溶剂极性的斯托克斯位移，然而，摩尔消光系数和荧光量子产率通常较共振染料为低。简言之，有机染料分子小、结构简单、可以快速通过很多生物屏障，且商品化的分子较多，在体内外荧光成像、DNA自动测序、抗体免疫分析、抗癌药物开发、疾病诊断等方面应用广泛。但一般而言，其光化学稳定性较差，易于光漂白和降解；斯托克斯位移较小，易于受到干扰而降低检测灵敏度；荧光寿命在细胞和组织内停留时间较短，较难以实现长时间的实时动态信号追踪，在生物医学领域的应用受到了一定限制。 半导体量子点（quantum dots，QDs)具有以下独特的光谱性质： （1）宽激发，窄发射，即激发波长范围宽而发射波长范围窄，因而可用同一波长同时激发多种量子点而获得多色荧光； （2）发射峰较窄，峰形对称，重叠小； （3）量子限域效应显著，可以通过调节粒径和组成来实现发射波长的调控； （4）荧光强度较高、稳定性及抗光漂白能力较强，便于对标记物进行长期、实时跟踪观察； （5）经表面修饰后，生物兼容性好，易于进行特异性连接，进而进行生物活体标记和检测； （6）双光子截面较大，可在较低激发强度下进行活体的深层组织成像。

书籍目录

1绪论 1.1一氧化氮的发现及应用 1.2一氧化氮的产生和代谢 1.3一氧化氮的性质 1.4一氧化氮的生理功能 1.4.1在心血管系统中的作用 1.4.2在神经系统中的作用 1.4.3 在免疫系统中的作用 1.4.4在消化系统中的作用 1.4.5在泌尿系统中的作用 1.4.6在呼吸系统中的作用 1.4.7在植物中的生理功能 1.5一氧化氮的检测方法 1.5.1 紫外，可见光谱法 1.5.2化学发光法 1.5.3电子自旋共振光谱法 1.5.4 电化学法 1.5.5 色谱法 1.5.6毛细管电泳法 1.5.7荧光分析法 1.5.8其他方法 2一氧化氮荧光探针 2.1 概述 2.1.1 荧光分子探针识别机理 2.1.2 荧光探针常见的荧光团 2.2 NO荧光探针 2.2.1芳香邻二氨类 2.2.2金属配合物荧光探针 2.2.3二氯荧光素类荧光探针 3一氧化氮荧光测定 3.1概述 3.2基于二氨基荧光素衍生物的HPLC—荧光法 3.2.1 基于DAF—FM的HPLC—荧光法 3.2.2基于DAF—2的HPLC—荧光法

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